聚集诱导发光型荧光探针在生物标志物检测中的研究进展

doi:10.19894/j.issn.1000-0518.250087

摘要/Abstract

摘要：

聚集诱导发光（AIE）受到了越来越多的关注，并已被广泛应用于生化分析、光电材料等多个领域。不同于传统的荧光探针，AIE型荧光探针聚集后，分子内运动由于空间位阻而受限，从而表现出强发光。AIE型荧光探针表现出更高的选择性、灵敏度和信噪比，以及更短的响应时间。这些优势使得聚集诱导发光广泛应用于生化检测、疾病的早期诊疗和细胞成像等多个方面。本文总结了AIE型荧光探针在酶、金属离子和生物活性小分子等生物标志物检测中的应用。此外，还讨论了AIE型荧光探针面临的挑战和未来的发展前景。

关键词: 聚集诱导发光, 荧光探针, 生物标志物, 生物成像

Abstract:

Aggregation-induced emission （AIE） has received increasing attention and has been applied widely in various fields such as biochemical analysis and optoelectronic materials. Unlike conventional fluorescent probes， AIE fluorescent probes exhibit strong luminescence due to limited intramolecular movement caused by steric hindrance after aggregation. AIE fluorescent probes reveal higher selectivity， sensitivity， signal-to-noise ratio， and shorter response time. These advantages make AIE a promising tool in biochemical detection， early diagnosis and treatment of disease and cell imaging. Herein， the applications of AIE fluorescent probes in the detection of different biomarkers are summarized. In addition， challenges and development prospects of AIE fluorescent probes in the future are discussed.

Key words: Aggregation-induced emission, Fluorescent probes, Biomarkers, Biological imaging

中图分类号:

O656

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图/表 25

表1 目前公认的部分生物标志物及相关疾病

Table 1 Examples of universally acknowledged biomarkers and related diseases

Diseases	Biomarkers
Lung cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， neuron specific enolase （NSE）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA）， cytokeratin 19 fragment antigen （CYFRA21-1）， biothiols etc.
Liver cancer	Alpha fetoprotein （AFP）， alpha-L fucosidase （AFU）， hepatocyte growth factor （HGF） etc.
Gastric cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， carbohydrate antigen （CA 19-9， CA72-4）， pepsinogen Ⅰ/Ⅱ（PG Ⅰ/Ⅱ） etc.
Breast cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， carbohydrate antigen （CA）， tissue polypeptide specific antigen （TPS）， epithelial cadherin （E-cadherin）， alkaline phosphatase （ALP）， nitroreductase （NTR）， H₂S etc.
Cervical cancer	Carbohydrate antigen （CA125，CA72-4）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA）， hepatocyte growth factor （HGF）， mixed lineage kinase domain-like protein （MLKL）， Cu²⁺， Hg²⁺etc.
Ovary cancer	Tumor necrosis factor-α （TNF-α）， humanepididymisprotein4 （HE4）， hexokinase2 （HK2）， sequestosome-1 （SQSTM1/p62），β-galactosidase （β-Gal） etc.
Colorectal cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， lactate dehydrogenase （LDH）， microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta （MAP1LC3B）， unc-51 like autophagy activating kinase 1 （ULK-1）， glutathione （GSH） etc.
Cardiovascular disease	Myoglobin （Myo）， cardiac troponin （cTn）， creatine kinase isoenzyme （CK-MB）， B-type natriuretic peptide （BNP）， growth differentiation factor 15 （GDF-15） etc.
Alzheimer's disease	Amyloid-β peptides （Aβ peptides）， tau protein， apolipoprotein E （apoE）， circulating free microRNAs （miRNAs）， alpha-1 antitrypsin （AAT）， Zn²⁺etc.
Inflammation	C-reactive protein （CRP）， serum amyloid A （SAA）， procalcitonin （PCT）， ferritin （SF）， reactive oxygen species （ROS） etc.

表1 目前公认的部分生物标志物及相关疾病

Table 1 Examples of universally acknowledged biomarkers and related diseases

Diseases	Biomarkers
Lung cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， neuron specific enolase （NSE）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA）， cytokeratin 19 fragment antigen （CYFRA21-1）， biothiols etc.
Liver cancer	Alpha fetoprotein （AFP）， alpha-L fucosidase （AFU）， hepatocyte growth factor （HGF） etc.
Gastric cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， carbohydrate antigen （CA 19-9， CA72-4）， pepsinogen Ⅰ/Ⅱ（PG Ⅰ/Ⅱ） etc.
Breast cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， carbohydrate antigen （CA）， tissue polypeptide specific antigen （TPS）， epithelial cadherin （E-cadherin）， alkaline phosphatase （ALP）， nitroreductase （NTR）， H₂S etc.
Cervical cancer	Carbohydrate antigen （CA125，CA72-4）， squamous cell carcinoma antigen （SCCA）， hepatocyte growth factor （HGF）， mixed lineage kinase domain-like protein （MLKL）， Cu²⁺， Hg²⁺etc.
Ovary cancer	Tumor necrosis factor-α （TNF-α）， humanepididymisprotein4 （HE4）， hexokinase2 （HK2）， sequestosome-1 （SQSTM1/p62），β-galactosidase （β-Gal） etc.
Colorectal cancer	Carcinoembryonic antigen （CEA）， lactate dehydrogenase （LDH）， microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta （MAP1LC3B）， unc-51 like autophagy activating kinase 1 （ULK-1）， glutathione （GSH） etc.
Cardiovascular disease	Myoglobin （Myo）， cardiac troponin （cTn）， creatine kinase isoenzyme （CK-MB）， B-type natriuretic peptide （BNP）， growth differentiation factor 15 （GDF-15） etc.
Alzheimer's disease	Amyloid-β peptides （Aβ peptides）， tau protein， apolipoprotein E （apoE）， circulating free microRNAs （miRNAs）， alpha-1 antitrypsin （AAT）， Zn²⁺etc.
Inflammation	C-reactive protein （CRP）， serum amyloid A （SAA）， procalcitonin （PCT）， ferritin （SF）， reactive oxygen species （ROS） etc.

图1 （A） AIE探针TPAPyP的结构及其响应机理；（B）探针TPAPyP（100 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（C）探针TPAPyP（100 μmol/L）与不同浓度ALP共同孵育后的荧光光谱；（D）探针TPAPyP（2 μmol/L）在HeLa细胞和MDCK细胞中的荧光成像；（E） ROS探针DCFH在HeLa细胞（上）和MDCK细胞（下）中的荧光成像［34］

Fig.1 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPAPyP；（B） The fluorescence response of probe TPAPyP （100 μmol/L） after incubation with different analytes；（C） The fluorescence spectra of probe TPAPyP （100 μmol/L） after reaction with various concentrations of ALP；（D） The fluorescence imaging of HeLa cells and MDCK cells incubated with probe TPAPyP （2 μmol/L）；（E） The fluorescence imaging of HeLa cells （top） and MDCK cells （bottom） incubated with ROS probe DCFH［34］

图2 （A） AIE探针DQM-ALP的结构及其在细胞内的响应示意图；（B）探针DQM-ALP与ALP响应前后的动力学曲线；（C）探针DQM-ALP（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（D）探针DQM-ALP（10 μmol/L）在HeLa细胞中的荧光成像；（E）探针DQM-ALP（50 μmol/L）在小鼠肝癌肿瘤组织中的荧光成像［35］

Fig.2 （A） The structure and schematic illustration of intracellular response of AIE probe DQM-ALP；（B） The kinetic curves of probe DQM-ALP before and after response to ALP；（C） The fluorescence response of probe DQM-ALP （10 μmol/L） after incubation with different analytes；（D） The fluorescence imaging of HeLa cells incubated with probe DQM-ALP （10 μmol/L）；（E） Fluorescence imaging of liver tumor-bearing mice after injection of probe DQM-ALP （50 μmol/L）［35］

图3 （A） AIE探针QM-βgal的结构及其在细胞内的响应示意图；（B）探针QM-βgal（10 μmol/L）与不同浓度β-Gal响应后的荧光光谱及相应的线性关系；（C）探针QM-βgal（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（D）探针QM-βgal（10 μmol/L）在SKOV3细胞中的荧光成像［37］

Fig.3 （A） The structure and schematic illustration of intracellular response of AIE probe QM-βgal；（B） The fluorescence spectra of probe QM-βgal （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of β-Gal and corresponding linear relationship；（C） The fluorescence response of probe QM-βgal （10 μmol/L） after incubation with different analytes；（D） The fluorescence imaging of SKOV-3 cells incubated with probe QM-βgal （10 μmol/L）［37］

图4 （A） AIE探针DCMCA-β-gal的结构及其响应机理；（B）探针DCMCA-β-gal的比率荧光信号I676 nm/I550 nm与β-Gal浓度之间的线性关系；（C）探针DCMCA-β-gal在小鼠卵巢肿瘤中的荧光成像［38］

Fig.4 （A） The structure and response mechanism of AIE probe DCMCA-β-gal；（B） The linear relationship between the ratio-metric fluorescence intensity I676 nm/I550 nm of probe DCMCA-β-gal and the concentration of β-Gal；（C） Fluorescence imaging of ovarian tumor-bearing mice after injection of probe DCMCA-β-gal［38］

图5 （A） AIE探针Gal-TPE-BT的结构及其响应机理；（B）探针Gal-TPE-BT（10 μmol/L）与不同浓度β-Gal响应后的荧光光谱；（C）探针Gal-TPE-BT的比率式荧光信号I550 nm/I440 nm与β-Gal浓度之间的线性关系［39］

Fig.5 （A）The structure and response mechanism of AIE probe Gal-TPE-BT；（B） The fluorescence spectra of probe Gal-TPE-BT （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of β-Gal；（C） The linear relationship between the ratio-metric fluorescence intensity I550 nm/I440 nm of probe Gal-TPE-BT and the concentration of β-Gal［39］

图6 （A） AIE探针ABT-Gal的结构及其在细胞内的响应示意图；（B）探针ABT-Gal-1（20 μmol/L）在A549细胞和SKOV-3细胞中的荧光成像；（C）探针ABT-Gal-1的荧光强度与β-Gal浓度之间的线性关系；（D）探针ABT-Gal-1（10 μmol/L）与不同浓度β-Gal响应后的荧光光谱［40］

Fig.6 （A） The structure and schematic illustration of intracellular response of AIE probe ABT-Gal；（B） The fluorescence imaging of A549 cells and SKOV-3 cells incubated with probe ABT-Gal-1 （20 μmol/L）；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of probe ABT-Gal-1 and the concentration of β-Gal；（D） The fluorescence spectra of probe ABT-Gal-1 （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of β-Gal［40］

图7 （A） AIE探针Q-NO2的结构及其响应机理；（B）探针Q-NO2（10 μmol/L）与不同浓度硝基还原酶响应后的荧光光谱及相应的线性关系；（C）探针Q-NO2在小鼠乳腺肿瘤中的荧光成像；（D）探针Q-NO2在小鼠肿瘤中的荧光成像［41］

Fig.7 （A） The structure and response mechanism of AIE probe Q-NO2；（B） The fluorescence spectra of probe Q-NO2 （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of NTR and corresponding linear relationship；（C） Fluorescence imaging of breast tumor-bearing mice after injection of probe Q-NO2；（D） Fluorescence imaging of tumor-bearing mice after injection of probe Q-NO2［41］

图8 （A） AIE探针CyNP的结构及其响应机理；（B）探针CyNP在小鼠乳腺肿瘤中的荧光成像；（C）探针CyNP在小鼠乳腺肿瘤中的光热成像；（D）小鼠中肿瘤的图像［42］

Fig.8 （A） The structure and response mechanism of AIE probe CyNP；（B） Fluorescence imaging of breast tumor-bearing mice after injection of probe CyNP；（C） Photothermal imaging of breast tumor-bearing mice after injection of probe CyNP；（D） Photos of tumor in mice［42］

图9 （A） AIE探针TPE（OH）-8HQ的结构及其响应机理；（B）探针TPE（OH）-8HQ（10 μmol/L）与不同浓度Zn2+响应后的荧光光谱；（C）探针TPE（OH）-8HQ的荧光强度与Zn2+浓度之间的线性关系；（D）探针TPE（OH）-8HQ（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（E）探针TPE（OH）-8HQ（20 μmol/L）在HeLa细胞中的荧光成像；（F）探针TPE（OH）-8HQ（1 mmol/L）在试纸上对Zn2+的荧光响应图像［47］。

Fig.9 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPE（OH）-8HQ；（B） The fluorescence spectra of probe TPE（OH）-8HQ （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of Zn2+；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of probe TPE（OH）-8HQ and the concentration of Zn2+；（D） The fluorescence response of probe TPE（OH）-8HQ （10 μmol/L） after incubation with different analytes；（E） The fluorescence imaging of HeLa cells incubated with probe TPE（OH）-8HQ （20 μmol/L）；（F） Fluorescence response of TPE（OH）-8HQ （1 mmol/L） to Zn2+ on test papers［47］

图10 （A） AIE探针DHN的结构及其响应机理；（B）探针DHN（10 μmol/L）与Zn2+响应前后的吸收光谱；（C） PVA_DHN复合薄膜的检测机理；（D）在紫外照射下DHN响应不同浓度Zincovit的照片；（E）探针DHN（5 μmol/L）在N2a细胞中的荧光成像［48］

Fig.10 （A） The structure and response mechanism of AIE probe DHN；（B） The absorption spectra of probe DHN（10 μmol/L） before and after response to Zn2+；（C） The detection mechanism of PVA_DHN composite film；（D） Photos of DHN response to various concentrations of Zincovit under UV irradiation；（E） The fluorescence imaging of N2a cells incubated with probe DHN （5 μmol/L）［48］

图11 （A） AIE探针Cm-o-TPA和Cm-p-TPA的设计策略；（B）探针Cm-o-TPA和Cm-p-TPA在四氢呋喃（THF）溶液中的归一化吸收光谱；（C）探针Cm-p-TPA在含有不同水分数（fw）的THF/H2O混合溶剂中的荧光光谱；（D）纳米探针Cm-p-TPA NPs（10 μmol/L）在HeLa细胞中的寿命变化；（E）纳米探针Cm-p-TPA NPs（10 μmol/L）对线粒体自噬过程的监测［51］

Fig.11 （A） The design strategy of AIE probe Cm-o-TPA and Cm-p-TPA；（B） The normalized absorption spectra of Cm-o-TPA and Cm-p-TPA in tetrahydrofuran （THF） solution；（C） The fluorescence spectra of Cm-p-TPA in THF/H2O mixed solvent with different water fractions （fw）；（D） The lifetime changes of Cm-p-TPA NPs （10 μmol/L） in HeLa cells；（E） Monitoring of mitophagy process with Cm-p-TPA NPs （10 μmol/L）［51］

图12 （A） AIE探针DPP的结构及其响应机理；（B）探针DPP的相对荧光强度I648 nm/I0与Cu2+浓度之间的线性关系；（C）探针DPP（20 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（D）探针DPP（10 μmol/L）在HeLa细胞中的荧光成像［52］

Fig.12 （A） The structure and response mechanism of AIE probe DPP；（B） The linear relationship between the relative fluorescence intensity I648 nm/I0 of probe DPP and the concentration of Cu2+；（C） The fluorescence response of probe DPP （20 μmol/L） after incubation with different analytes；（D） The fluorescence imaging of HeLa cells incubated with probe DPP（10 μmol/L）［52］

图13 （A） AIE探针R1、R2、TPP-Cl和TPP-Br的结构及TPP-Br的响应机理；（B）探针TPP-Br的荧光强度与Hg2+浓度之间的线性关系；（C）在Hg2+（30?μmol/L）存在的条件下，探针TPP-Br（50 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（D）探针TPP-Br（10 μmol/L）在HeLa细胞中的荧光成像［57］

Fig.13 （A） The structure of AIE probe R1， R2， TPP-Cl and TPP-Br and response mechanism of TPP-Br；（B） The linear relationship between the fluorescence intensity of probe TPP-Br and the concentration of Hg2+；（C） The fluorescence response of probe TPP-Br （50 μmol/L） after incubation with different analytes in the presence of Hg2+ （30?μmol/L）；（D） The fluorescence imaging of HeLa cells incubated with probe TPP-Br （10 μmol/L）［57］

图14 （A） AIE探针TPE-4TA的结构及其响应机理；（B）掺杂TPE-4TA的聚乙烯醇基水凝胶薄膜；（C）聚乙烯醇基水凝胶薄膜与不同浓度Hg2+响应后的荧光光谱；（D）聚乙烯醇基水凝胶薄膜的荧光强度与Hg2+浓度之间的线性关系［58］

Fig.14 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPE-4TA；（B） The polyvinyl alcohol （PVA）-based hydrogel film dopped with TPE-4TA；（C） The fluorescence spectra of PVA-based hydrogel film after reaction with various concentrations of Hg2+；（D） The linear relationship between the fluorescence intensity of PVA-based hydrogel film and the concentration of Hg2+［58］

图15 （A） AIE探针TBL的结构及其响应机理；（B）探针TBL在含有不同水分数（fw）的二甲基亚砜（DMSO）/H2O混合溶剂中的荧光光谱；（C）在H2O2/NaClO混合溶液中，由一片约3 mm厚的猪肉火腿覆盖的鲁米诺点（1.2 mmol/L）和TBL点（1.2 mmol/L）的化学发光图像；（D）往小鼠中注射H2O2/NaClO混合溶液后，TBL点的荧光成像；（E） TBL点对小鼠中乳腺肿瘤的化学发光成像［65］

Fig.15 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TBL；（B） The fluorescence spectra of TBL in dimethyl sulfoxide （DMSO）/H2O mixed solvent with different water fractions （fw）；（C） Chemiluminescence of luminol dots （1.2 mmol/L） and TBL dots （1.2 mmol/L） covered by a piece of approximately 3 mm thick pork ham in a H2O2/NaClO mixed solution；（D） The chemiluminescence imaging of mice after subcutaneous injection of TBL dots with H2O2 and NaClO；（E） The chemiluminescence imaging of breast tumor-bearing mice after injection of TBL dots［65］

图16 （A） AIE探针TPE-N（Ph）-DBT-PH的结构及其响应机理；（B）探针TPE-N（Ph）-DBT-PH的化学发光光谱；（C）探针TPE-N（Ph）-DBT-PH的化学发光强度与1O2浓度之间的线性关系；（D）探针TPE-N（Ph）-DBT-PH（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的化学发光响应；（E）探针TPE-N（Ph）-DBT-PH在RAW 264.7细胞中的化学发光成像；（F）探针TPE-N（Ph）-DBT-PH在关节炎小鼠模型中的化学发光成像［66］

Fig.16 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPE-N（Ph）-DBT-PH；（B） The chemiluminescence spectra of TPE-N（Ph）-DBT-PH；（C） The linear relationship between the chemiluminescence intensity of probe TPE-N（Ph）-DBT-PH and the concentration of 1O2；（D） The chemiluminescence response of probe TPE-N（Ph）-DBT-PH （10 μmol/L） after incubation with different analytes；（E） The chemiluminescence imaging of RAW 264.7 cells incubated with probe TPE-N（Ph）-DBT-PH；（F） The chemiluminescence imaging of a arthritismouse model after injection of TPE-N（Ph）-DBT-PH［66］

图17 （A） AIE探针BTPAB的结构及其响应机理；（B）探针BTPAB（10 μmol/L）与不同浓度H2O2响应后的荧光光谱；（C）探针BTPAB的相对荧光强度与H2O2浓度之间的线性关系；（D）探针BTPAB在HeLa细胞中的荧光成像；（E）探针BTPAB在TLC板上的荧光响应图像及相应的线性关系［69］

Fig.17 （A） The structure and response mechanism of AIE probe BTPAB；（B） The fluorescence spectra of BTPAB（10 μmol/L） after reaction with various concentrations of H2O2；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of BTPAB and the concentration of H2O2；（D） The fluorescence imaging of HeLa cells incubated with probe BTPAB；（E） Fluorescence response of BTPAB to H2O2 on TLC plates and corresponding linear relationship［69］

图18 （A） AIE探针BTPE-NO2的结构及其响应机理；（B）探针BTPE-NO2@F127（BTPE-NO2 32.6?μg/mL）与不同浓度H2O2响应后的荧光光谱；（C）探针BTPE-NO2@F127的荧光强度与H2O2浓度之间的线性关系；（D） BTPE-NO2@F127在间质性膀胱炎小鼠模型中的荧光成像；（E） BTPE-NO2@F127在曲唑酮诱导的肝损伤小鼠模型中的荧光成像；（F） BTPE-NO2@F127在曲唑酮诱导的肝损伤小鼠模型中的多光谱光声断层扫描成像［70］

Fig.18 （A） The structure and response mechanism of AIE probe BTPE-NO2；（B） The fluorescence spectra of BTPE-NO2@F127 （BTPE-NO2 32.6?μg/mL） after reaction with various concentrations of H2O2；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of BTPE-NO2@F127 and the concentration of H2O2；（D） The fluorescence imaging of an interstitial cystitis mouse model after injection of BTPE-NO2@F127；（E） The fluorescence imaging of a trazodone-induced liver injury mouse model after injection of BTPE-NO2@F127；（F） The multispectral optoacoustic tomography imaging of a trazodone-induced liver injury mouse model after injection of BTPE-NO2@F127［70］

图19 （A） AIE探针QY-N的结构及其响应机理；（B）探针QY-N（10 μmol/L）与不同浓度NO响应后的荧光光谱；（C）探针QY-N的荧光强度与NO浓度之间的线性关系；（D） QY-N在小鼠肝脏中的荧光成像；（E） QY-N在小鼠肝脏中的多光谱光声断层扫描成像［73］

Fig.19 （A） The structure and response mechanism of AIE probe QY-N；（B） The fluorescence spectra of QY-N （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of NO；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of QY-N and the concentration of NO；（D） The fluorescence imaging of livers incubated with probe QY-N；（E） The multispectral optoacoustic tomography imaging of livers after injection of QY-N［73］

图20 （A）探针BNDA的结构及其响应机理；（B） BNDA@HβCD在乙酰氨基酚诱导的肝损伤小鼠模型中的荧光成像；（C） BNDA@HβCD在川楝素诱导的肝损伤小鼠模型中的荧光成像；（D） BNDA@HβCD在豆芽中的荧光成像［74］

Fig.20 （A） The structure and response mechanism of AIE probe BNDA；（B） The fluorescence imaging of an APAP-induced liver injury mouse model after injection of BNDA@HβCD；（C） The fluorescence imaging of an TSN-induce dliver injury mouse model after injection of BNDA@HβCD；（D） The fluorescence imaging of soybean sprouts［74］

图21 （A） AIE探针DNBS-HCA的结构及其响应机理；（B）探针DNBS-HCA分别与GSH、Cys和Hcy响应后的荧光光谱；（C）探针DNBS-HCA的荧光强度与GSH、Cys和Hcy浓度之间的线性关系；（D）探针DNBS-HCA在PC-3细胞和A549细胞中的荧光成像；（E）探针DNBS-HCA在试纸上对Cys的荧光响应图像［77］

Fig.21 （A） The structure and response mechanism of AIE probe DNBS-HCA；（B） The fluorescence spectra of DNBS-HCA after reaction with various concentrations of GSH， Cys and Hcy， repectively；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of DNBS-HCA and the concentration of GSH， Cys and Hcy， repectively；（D） The fluorescence imaging of PC-3 cells and A549 cells incubated with probe DNBS-HCA；（E） Fluorescence response of DNBS-HCA to Cys on test papers［77］

图22 （A） AIE探针TPEPY-S-Fc的结构及其响应机理；（B）探针TPEPY-S-Fc在CT-26细胞中的荧光成像；（C）在TPEPY-S-Fc（20 μmol/L）和GSH（200 μmol/L）存在的条件下，单线态氧探针SOSG的荧光光谱；（D） SOSG的相对荧光强度I530 nm/I0与时间的关系［78］

Fig.22 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPEPY-S-Fc；（B） The fluorescence imaging of CT-26 cells incubated with probe TPEPY-S-Fc；（C） The fluorescence spectra of 1O2 probe SOSG in the presence of TPEPY-S-Fc （20 μmol/L） and GSH （200 μmol/L）；（D） The time-dependent relative fluorescence intensity I530 nm/I0 of probe SOSG［78］

图23 （A） AIE探针HBS-DNP的结构及其响应机理；（B）探针HBS-DNP（10 μmol/L）与不同浓度H2S响应后的荧光光谱；（C）探针HBS-DNP的荧光强度与H2S浓度之间的线性关系；（D） HBS-DNP（10 μmol/L）在Hela细胞中的荧光成像［82］

Fig.23 （A） The structure and response mechanism of AIE probe HBS-DNP；（B） The fluorescence spectra of HBS-DNP （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of H2S；（C） The linear relationship between the fluorescence intensity of HBS-DNP and the concentration of H2S；（D） The fluorescence imaging of Hela cells incubated with probe HBS-DNP（10 μmol/L）［82］

图24 （A） AIE探针TPA-M的结构及其响应机理；（B） TPA-M（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（C）探针TPA-M（10 μmol/L）与不同浓度H2S响应后的荧光光谱及相应的线性关系；（D）在H2S（300?μmol/L）存在的条件下，探针TPA-M（10 μmol/L）与不同分析物孵育后的荧光响应；（E）探针TPA-M在MCF-7细胞中的荧光成像［83］

Fig.24 （A） The structure and response mechanism of AIE probe TPA-M；（B） The fluorescence response of probe TPA-M （10 μmol/L） after incubation with different analytes；（C） The fluorescence spectra of TPA-M （10 μmol/L） after reaction with various concentrations of H2S and corresponding linear relationship；（D） The fluorescence response of probe TPA-M （10 μmol/L） after incubation with different analytes in the presence of H2S（300?μmol/L）；（E） The fluorescence imaging of MCF-7 cells incubated with probe TPA-M［83］

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