于思为, 王良鹏, 金日哲, 康传清

应用化学 2022, 39 (12): 1903-1911. DOI:10.19894/j.issn.1000-0518.220071

摘要（322）

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对细胞生理环境下次氯酸根离子（ClO^－）进行高效识别在生理学和病理学研究方面具有重要意义。通过连续的碳碳双键连接二甲氨基取代的氧杂蒽结构与苯并噻唑结构，设计合成了一种新型荧光分子3，6-双（二甲胺基）-9-（1-（3-甲基-苯并噻唑））-三甲基））-氧杂蒽（R-1）。R-1在ClO^－存在下，600 nm处的荧光发射显著增强（量子产率高达20.3%），且其它活性氧物质不影响该探针对ClO^－的识别。荧光成像实验表明，探针R-1能够对人肺腺癌（A549）细胞内的ClO^－进行检测，并发出红色荧光，具有ClO^－生物成像的应用潜力。

图 9 探针R-1在A549细胞中的荧光成像（标尺：20 μm）
第1行：对照组，A549细胞施加Hoechst 33342染色；第2行：A549细胞施加探针 R-1及Hoechst 33342染色；第3行：LPS（1 μg/mL）孵育后的A549细胞施加探针 R-1及Hoechst 33342染色；第4行：次氯酸钠水溶液（5 μmol/L）孵育后的A549细胞施加探针 R-1及Hoechst 33342染色

随后，研究了探针 R- 1对细胞内外源性和内源性ClO－变化的响应能力（图9）。外源性ClO－来自次氯酸钠水溶液（5 μmol/L），内源性ClO－来自LPS（1 μg/mL）诱导细胞产生［19］。荧光成像效果通过Hoechst 33342（一种特异性标记DNA的染色剂［20］）和探针 R- 1共染色后在荧光显微镜下观测。如图9所示，没有施加外源性ClO－或诱导产生内源性ClO－时，与对照组类似，未观察到探针 R- 1的荧光发射；当使用外源性或内源性ClO－时，探针 R- 1呈现显著的红色荧光；且与Hoechst 33342染色对比，探针均匀分布于细胞质中。可见，探针 R- 1能够在细胞内检测外源性或内源性ClO－并可用于荧光成像。