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氧杂蒽类荧光探针对ClO 的识别和细胞成像应用
于思为, 王良鹏, 金日哲, 康传清
应用化学    2022, 39 (12): 1903-1911.   DOI:10.19894/j.issn.1000-0518.220071
摘要   (322 HTML9 PDF (2581KB)(307)  

对细胞生理环境下次氯酸根离子(ClO)进行高效识别在生理学和病理学研究方面具有重要意义。通过连续的碳碳双键连接二甲氨基取代的氧杂蒽结构与苯并噻唑结构,设计合成了一种新型荧光分子3,6-双(二甲胺基)-9-(1-(3-甲基-苯并噻唑))-三甲基))-氧杂蒽(R-1)。R-1在ClO存在下,600 nm处的荧光发射显著增强(量子产率高达20.3%),且其它活性氧物质不影响该探针对ClO的识别。荧光成像实验表明,探针R-1能够对人肺腺癌(A549)细胞内的ClO进行检测,并发出红色荧光,具有ClO生物成像的应用潜力。

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图 2 探针R-1(10 μmol/L)在甲醇/水溶液中和不同浓度的ClO反应的紫外光谱(A)以及在650 nm处的紫外吸收强度随ClO浓度的变化线性关系(B)
正文中引用本图/表的段落
为研究探针 R-1对次氯酸根的响应过程,用不同浓度的次氯酸钠水溶液与探针 R- 1的甲醇溶液等体积混合,探针 R-1的终浓度为10 μmol/L,观察该探针的紫外(图2)和荧光光谱(图3)的变化。如图2A所示,随着次氯酸钠浓度由0 μmol/L增加到20 μmol/L,探针 R- 1的溶液在360、550和650 nm处的吸光度逐渐降低,溶液颜色也由深蓝色转变为亮粉色,这意味着探针 R- 1的结构对次氯酸根具有良好的响应特性。选取探针在650 nm处吸光度值随不同浓度的次氯酸钠的变化作图,如图2B所示,吸光度随次氯酸根浓度的变化具有良好的线性关系( R2=0.9917),其线性回归方程为 y=-0.0068 x+0.227,根据检测限公式LOD=3.3 σ/ k计算,其中, σ为紫外吸收值的标准差, k为直线的斜率,得到该探针的检测限为20.09 nmol/L,说明该探针有良好的次氯酸钠检测灵敏度。
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