基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的荆莲核消方化学成分分析

doi:10.19894/j.issn.1000-0518.230336

摘要/Abstract

摘要：

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS^E），结合UNIFI软件对荆莲核消方（JLHXF）进行化学成分解析。使用Supelco Ascentis?Express C18色谱柱（3.0 mm×50 mm， 2.7 μm）在乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）的流动相体系下进行梯度洗脱；利用电喷雾离子源（ESI）在正、负离子模式下进行扫描，借助UNIFI软件及相关文献对成分进行分析鉴定。通过UPLC-Q-TOF-MS^E技术在正、负离子模式下采集复方的质谱数据，通过化合物的精确相对分子质量和串联质谱数据采用UNIFI软件辅助解析，结合对照品质谱信息及相关文献，共鉴定和推断出187个化学成分，其中黄酮类化合物77个、有机酸类化合物41个、萜类化合物26个、苯丙素类化合物24个、苯酞类化合物12个以及其他类化合物7个。 UPLC-Q-TOF-MS^E技术可快速鉴定出荆莲核消方中的化学成分，准确性较高，为该方药效物质基础研究提供了可靠依据。

关键词: 荆莲核消方, 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术, 化学成分, UNIFI软件

Abstract:

Chemical composition analysis of Jinglian Hexiao Formula was conducted using ultra-performance liquid chromatography tandem quadrupole time-of-flight mass spectrometry （UPLC-Q-TOF-MS^E） combined with UNIFI software. The Supelco Ascentis?Express C18 column （3.0 mm×50 mm， 2.7 μm） was used for gradient elution with a mobile phase system of acetonitrile （A） -0.1% formic acid aqueous solution （B）. The electrospray ion source （ESI） was used to scan in the positive and negative ion mode， and UNIFI software and related literature were used to analyze and identify the components. The accurate relative molecular mass and tandem mass spectrometry data of the compounds were analyzed with the assistance of UNIFI software， and in combination with the mass spectrometry information of reference standards and relevant literature. A total of 187 chemical components were identified， including 77 flavonoids， 41 organic acids， 26 terpenoids， 24 phenylpropanoids， 12 phthalides and 7 other compounds. UPLC-Q-TOF-MS^E technology can rapidly identify the chemical components in Jinglian Hexiao Formula with high accuracy， providing a reliable basis for the study of pharmacological substance.

Key words: Jinglian Hexiao Formula, Ultra-performance liquid chromatography tandem quadrupole time-of-flight mass spectrometry, Chemical composition, UNIFI

中图分类号:

O657.6

李欣, 李念, 胡健楠, 顾晶业, 段瑶, 郭亦男, 朴东, 刘子婷, 皮子凤, 越皓. 基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的荆莲核消方化学成分分析[J]. 应用化学, 2024, 41(5): 712-727.

Xin LI, Nian LI, Jian-Nan HU, Jing-Ye GU, Yao DUAN, Yi-Nan GUO, Dong PIAO, Zi-Ting LIU, Zi-Feng PI, Hao YUE. Chemical Composition Analysis of Jinglian Hexiao Formula Based on Ultra-High Liquid Chromatography Tandem Quadrupole-Time-of-Flight Mass Spectrometry[J]. Chinese Journal of Applied Chemistry, 2024, 41(5): 712-727.

图/表 6

图1 荆莲核消方在正离子模式（A）和负离子模式（B）下的BPI图

Fig.1 BPI maps of JLHXF in positive ion mode （A） and negative ion mode （B）

图2 荭草苷质谱图（（A）供试品、（B）对照品）及可能的裂解途径（C）

Fig.2 Mass spectra of Orientin （sample （A）， standard （B）） and possible cleavage pathways （C）

图3 绿原酸质谱图（A样品、B对照品）及可能的裂解途径（C）

Fig.3 Mass spectra of Chlorogenic acid （sample （A）， standard （B）） and possible cleavage pathways （C）

图4 甘草酸质谱图（A、B）及可能的裂解途径（C）

Fig.4 Mass spectra of glycyrrhizic acid （sample （A）， standard （B）） and possible cleavage pathways （C）

图5 氧化前胡素可能的裂解途径

Fig.5 Possible cleavage pathways of oxypeucedanin

图6 藁本内酯可能的裂解途径

Fig.6 Possible cleavage pathways of ligustilide

参考文献 35

1	郭亦男，郭莹，刘玉书. 刘玉书教授治疗儿童腺样体肥大学术思想及临证经验［J］. 时珍国医国药， 2021， 32（11）： 2752-2754.
	GUO Y N，GUO Y，LIU Y S. Professor Liu Yushu's academic thinking and clinical experience in treating adenoid hypertrophy in children［J］. Lishizhen Med Mater Med Res， 2021， 32（11）： 2752-2754.
2	闫伊萌，岳可心，刘玉生，等. 基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的黄英咳喘糖浆化学成分分析［J］. 应用化学， 2021， 38（3）： 276-288.
	YAN Y M， YUE K X， LIU Y S， et al. Characterization of components in Huangying Kechuan Syrup by ultra-high liquid chromatography tandem quadrupole-time-of-flight mass spectrometry［J］. Chin J Appl Chem， 2021， 38（3）： 276-288.
3	周熙，吴惠勤，罗辉泰，等. 基于超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱的克咳片化学成分快速识别研究［J］.分析测试学报， 2023， 42（4）： 411-422.
	ZHOU X， WU H Q， LUO H T， et al. Rapid identification of constituents in Keke tablets by high-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spoectrometry［J］. J Instrum Anal， 2023， 42（4）： 411-422.
4	李乐，谭璐瑩，王彩霞，等. 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法鉴定西洋参果梗化学成分［J］. 应用化学， 2021， 38（3）： 256-270.
	LI L， TAN L Y， WANG C X， et al. Identification of chemical constituents in the stem of American Ginseng by ultra high performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry［J］. Chin J Appl Chem， 2021， 38（3）：256-270.
5	刘艺苑，刘传敏，李新朋，等. 金莲花黄酮类成分抗菌及抗氧化活性研究［J］. 药学研究， 2023， 42（4）： 228-231， 242.
	LIU Y Y， LIU C M， LI X P， et al. Study on antibacterial and antioxidant activities of flavonoids from Trollius chinensis Bge［J］. J Pharm Res， 2023， 42（4）： 228-231， 242.
6	李正红，郑志田，梁生林. 紫荆皮镇痛抗炎活性部位的筛选［J］. 药品评价， 2023， 20（4）： 402-407.
	LI Z H， ZHENG Z T， LIANG S L. Screening of the analgesic and anti-inflammatory active fractions from Cercis Chinensis Bunge Bark［J］. Drug Eval， 2023， 20（4）： 402-407.
7	谭知浩，肖志葵，罗弘杉，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS与网络药理学探讨夏枯草茎叶抗炎有效成分及其作用机制［J］. 现代药物与临床， 2023， 38（4）： 795-804.
	TAN Z H， XIAO Z K， LUO H S， et al. Effective components of Prunella vulgaris stem and leaf and their antiinflammatory mechanism based on UPLC-Q-TOF-MS/MS and network pharmacology［J］. Drugs Clin， 2023， 38（4）： 795-804.
8	刘树民，曹敏，武斌，等. 基于UPLC-TOF/MS的苍耳子不同部位化学成分研究［J］. 中药材， 2013， 36（6）： 924-929.
	LIU S M， CAO M， WU B， et al. Study on the chemical composition in different parts of Xanthii Fructus based on UPLC-TOF/MS［J］. J Chin Med Mater， 2013， 36（6）： 924-929.
9	秦艳，尹建兵，杜冬生，等. 中药紫花地丁黄酮碳苷类化学成分的超高效液相色谱-电喷雾离子源-四极杆飞行时间串联质谱研究［J］. 分析测试学报， 2017， 36（1）： 9-17.
	QIN Y， YIN J B， DU D S， et al.Characterization of flavone di-C-glycosides in viola yedoensis by ultrahigh performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole time of flight-mass spectrometry［J］. J Instrum Anal， 2017， 36（1）： 9-17.
10	谢彤，徐建亚，沈存思，等. 基于UPLC/LTQ-Orbitrap-MS的黄芩中黄酮碳苷的结构表征及同分异构体的区分［J］.中草药， 2015， 46（22）： 3318-3325.
	XIE T， XU J Y， SHEN C S， et al. Structural characterization of c-glycosyl flavonoids in scutellaria baicalensis and differentiation of isomers by UPLC/LTQ-Orbitrap-MS［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2015， 46（22）： 3318-3325.
11	朱赟斐，谭善忠，王洪兰，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的益气健脾颗粒化学成分分析［J］. 中草药， 2022， 53（12）： 3601-3613.
	ZHU Y F， TAN S Z， WANG H L， et al. Identification of chemical constituents in Yiqi Jianpi Granules by UPLC-Q-TOF-MS/MS［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2022， 53（12）： 3601-3613.
12	白玉静，卢建秋，张宏桂. 荭草苷、牡荆苷和葛根素碳苷类化合物的电喷雾质谱裂解规律及解析［J］. 中草药， 2010， 41（3）： 361-364.
	BAI Y J， LU J Q， ZHANG H G. Analysis of Orientoside， Vitexin and Puerarin by electrospray ionization mass spectrometry［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2010， 41（3）： 361-364.
13	任晓蕾，霍金海，孙国东，等. 短瓣金莲花化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析［J］. 中草药， 2015， 46（23）： 3475-3481.
	REN X L， HUO J H， SUN G D， et al. Analysis on chemical constituents from flowers of Trollius ledebouri by UPLC-Q-TOF-MS［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2015， 46（23）： 3475-3481.
14	史静超，张淑蓉，柴智，等. 基于UPLC-QE-Orbitrap-MS技术的芪蛭降糖胶囊化学成分分析［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021， 27（16）： 116-123.
	SHI J C， ZHANG S R， CHAI Z， et al.Analysis of chemical constituents in Qizhi Jiangtang capsules based on UPLC-QE-Orbitrap-MS［J］. Chin J Exp Tradit Med Formulae， 2021， 27（16）： 116-123.
15	雷冬梅，姚长良，陈雪冰，等. 基于RP-Q-TOF-MS和HILIC-Q-TOF-MS的经典名方当归补血汤成分分析［J］. 中国中药杂志， 2022， 47（8）： 2109-2120.
	LEI D M， YAO C L， CHEN X B， et al. Analysis of chemical constituents in classical prescription Danggui Buxue Decoction based on RP-Q-TOF-MS and HILIC-Q-TOF-MS［J/OL］. China J Chin Mater Med， 2022， 47（8）： 2109-2120.
16	YANG B， LI H， RUAN Q F， et al. A facile and selective approach to the qualitative and quantitative analysis of triterpenoids and phenylpropanoids by UPLC/Q-TOF-MS/MS for the quality control of Ilex rotunda‍［J/OL］. J Pharm Biomed Anal， 2018， 157： 44-58.
17	谢飞，陈满堂，王昇，等. 基于电喷雾质谱的多酚加合离子［J］. 烟草科技， 2023， 56（5）： 42-48.
	XIE F， CHEN M T， WANG S， et al. Polyphenol adduct ions based on electrospray ionization mass spectrometry‍［J］. Tob Sci Technol， 2023， 56（5）： 42-48.
18	孙国东，霍金海，张树明，等. UPLC-Q-TOF/MS法分析川菊止痛胶囊成分［J］. 中成药， 2019， 41（12）： 3052-3060.
	SUN G D， HUO J H， ZHANG S M， et al. UPLC-Q-TOF/MS analysis of components in Chuanju Zhitong Capsules‍［J］. Chin Tradit Pat Med， 2019， 41（12）： 3052-3060.
19	张雯霞，冯敏，苗雨露，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的还贝止咳方化学成分分析［J］. 中国中药杂志， 2019， 44（14）： 3022-3034.
	ZHANG W X， FENG M， MIAO Y L， et al. Analysis of chemical components of Huanbei Zhike prescription based on UPLC-Q-TOF-MS /MS technology［J］. China J Chin Mater Med， 2019， 44（14）： 3022-3034.
20	李子祥，邓敏，王晨悦，等. 基于UPLC/Q-TOF MS/MS的花生油成分分析［J］. 中国油脂， 2021， 46（3）： 122-127.
	LI Z X， DENG M， WANG C Y， et al. Component analysis of peanut oil based on UPLC/Q-TOF MS/MS［J］. China Oils Fats， 2021， 46（3）： 122-127.
21	叶馨源，吴建明，杨杰，等. 白背三七化学成分及代表性成分质谱裂解特征的研究进展［J］. 中草药， 2021， 52（21）： 6687-6700.
	YE X Y， WU J M， YANG J， et al. Research progress on chemical constituents of Gynura divaricate and mass spectrometry-based fragmentation rules of representative components［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2021， 52（21）： 6687-6700.
22	赵毅萌，张礼欣，杨舒昀，等. 基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术的中药荆芥穗化学成分表征与鉴定［J］. 中国中药杂志， 2024， 49（2）： 420-430.
	ZHAO Y M， ZHANG L X， YANG S Y， et al. Characterization of chemical constituents from traditional Chinese medicine Schizonepetae Spica based on UHPLC-Q-TOF-MS/MS technique［J］. China J Chin Mater Med， 2024， 49（2）： 420-430.
23	郭敏群，严曾豪，吴灏，等. 基于UFLC-Triple-TOF-MS/MS技术的白虎加桂枝汤化学物质基础［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019， 25（10）： 134-141.
	GUO M Q， YAN Z H， WU H， et al. Chemical material basis of extract of Baihu Jia Guizhi Tang by UFLC-Triple TOF-MS/MS［J］. Chin J Exp Tradit Med Formulae， 2019， 25（10）： 134-141.
24	顿珠次仁，邓敏芝，朱根华，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS技术快速分析裂叶独活中香豆素类成分［J］. 中药新药与临床药理， 2022， 33（1）： 105-114.
	DUNZHU C R， DENG M Z， ZHU G H， et al. Analysis of chemical constituents of coumarins in Heraeleum millefolium by UPLC-Q-TOF-MS［J］. Tradit Chin Drug Res Clin Pharmacol， 2022， 33（1）： 105-114.
25	刘明亮，张奥，冯薇，等. UHPLC-Q-TOF-MS分析当归在饮片与当归建中汤标准汤剂中3类成分的变化［J］. 中国药学杂志， 2022， 57（8）： 613-622.
	LIU M L， ZHANG A， FENG W， et al. Comparation and analysis of three kinds of components in Angelicae Sinensis Radix pieces and Danggui Jianzhong Decoction by UHPLC-Q-TOF-MS［J］. Chin Pharm J， 2022， 57（8）： 613-622.
26	张纪红，吴卫东，刘建庭，等. 基于UPLC-Q-TOF/MS技术活血止痛胶囊化学成分的快速分析［J］. 中草药， 2020， 51（12）： 3139-3146.
	ZHANG J H， WU W D， LIU J T， et al. Rapid analysis of chemical constituents of Huoxue Zhitong Capsules based on UPLC-Q-TOF/MS［J］. Chin Tradit Herb Drugs， 2020， 51（12）： 3139-3146.
27	赵重博，王晶，祁春艳，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的天南星炮制特征成分初步研究［J］. 现代中医药， 2022， 42（5）： 11-20.
	ZHAO Z B， WANG J， QI C Y， et al. Preliminary study on processing characteristic componentsof Aralia based on UPLC-O-TOF-MS/MS［J］. Mod Chin Med， 2022， 42（5）： 11-20.
28	秦烨，黄玮，顾雨芳，等. 基于UHPLC-Q-TOF/MS技术快速分析消痰通腑方化学成分［J］. 药学实践杂志， 2022， 40（4）： 339-346.
	QIN Y， HUANG W， GU Y F， et al. Rapid analysis of chemical components of Xiaotan Tongfu formula based on UHPLC-Q-TOF/MS［J］. J Pharm Pract， 2022， 40（4）： 339-346.
29	梁红宝，孙建之，姜宇珺，等. 基于GC-MS和UPLC-Q-Exactive MS技术的首荟通便胶囊质量标志物研究［J］. 中草药， 2022， 53（21）： 6674-6685.
	LIANG H B， SUN J Z， JIANG Y J， et al. Study on quality markers of Shouhui Tongbian Capsule based on GC-MS and UPLC-Q-Exactive MS technology［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2022， 53（21）： 6674-6685.
30	张嘉颖，李海波，刘苓娴，等. 基于UPLC-Q/TOF-MS的金振口服液在大鼠体内外源物表征［J］. 中草药， 2022， 53（10）： 2956-2967.
	ZHANG J Y， LI H B， LIU L X， et al. Characterization of xenobiotics of Jinzhen Oral Liquid in rats based on UPLC-Q/TOF-MS［J］. Chin Tradit Herbal Drugs， 2022， 53（10）： 2956-2967.
31	王忆勤，徐宏喜. 中药复方化学成分的研究进展［J］. 上海中医药杂志， 2001（3）： 45-49.
	WANG Y Q， XU H X. Research progress on the chemical components of traditional Chinese medicine compound formulas［J］. Shanghai J Tradit Chin Med， 2001（3）： 45-49.
32	蔡红业，吴谨，徐林忠. 基于UHPLC-Q-TOF-MS技术和网络药理学的金莲花抗炎药效物质基础及作用机制研究［J］. 现代药物与临床， 2023， 38（5）： 1041-1050.
	CAI H Y， WU J， XU L Z. Material basis and mechanism of anti-inflammation effect of Trollius chinensis Bge. based on UHPLC-Q-TOF-MS and network pharmacology［J］. Drugs Clin， 2023， 38（5）： 1041-1050.
33	费程浩，童黄锦，李昱，等. 莪术治疗冠心病的物质基础及作用机制预测研究［J］. 中国中药杂志， 2022， 47（12）： 3270-3284.
	FEI C H， TONG H J， LI Y， et al. Prediction of material basis and mechanism of Curcumae Rhizoma in treatment of coronary heart disease［J］. China J Chin Mater Med， 2022， 47（12）： 3270-3284.
34	谭知浩，肖志葵，罗弘杉，等. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS与网络药理学探讨夏枯草茎叶抗炎有效成分及其作用机制［J］. 现代药物与临床， 2023， 38（4）： 795-804.
	TAN Z H， XIAO Z K， LUO H S， et al. Effective components of Prunella vulgaris stem and leaf and their antiinflammatory mechanism based on UPLC-Q-TOF-MS/MS and network pharmacology［J］. Drugs Clin， 2023， 38（4）： 795-804.
35	张倩芸，董文敏，王新宏，等. UPLC-LTQ-Orbitrap-MS法分析甘草干姜汤配伍前后化学成分变化［J］. 中成药， 2023， 45（1）： 311-316.
	ZHAN Q Y， DONG W M， WANG X H， et al. UPLC-LTQ-Orbitrap-MS analysis of changes in chemical components of Gancao Ganjiang Tang before and after compatibility［J］. Chin Tradit Pat Med， 2023， 45（1）： 311-316.

[1]	胡轩, 吴同川, 艾鑫丹, 何兴悦, 徐弘康, 郑飞, 越皓, 戴雨霖. 液质联用结合网络药理学探究少腹逐瘀汤抗宫颈癌活性机理[J]. 应用化学, 2024, 41(5): 687-702.
[2]	张瀚水, 龚本义, 南敏伦, 赫玉芳, 赵昱玮, 吴丛梅, 殷玉和. UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选[J]. 应用化学, 2023, 40(11): 1587-1594.
[3]	张龄予, 侯苏芯, 张文尉, 姜姗, 刘俊潼, 越皓, 张楠. 蓝靛果的化学成分及其提取分离研究进展[J]. 应用化学, 2022, 39(11): 1629-1640.
[4]	李乐, 谭璐瑩, 王彩霞, 李坤, 李平亚, 刘金平, 刘云鹤. 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法鉴定西洋参果梗化学成分[J]. 应用化学, 2021, 38(3): 256-270.
[5]	闫伊萌, 岳可心, 刘玉生, 陈革, 田涵雯, 刘忠英, 刘志强, 宋凤瑞, 皮子凤. 基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的黄英咳喘糖浆化学成分分析[J]. 应用化学, 2021, 38(3): 276-288.
[6]	张慧娥, 侯剑峰, 王经元, 朱爽, 杜连云, 叶萍, 魏琨, 陈长宝, 李光, 王恩鹏. 人参不同部位提取物体外抗氧化活性及成分差异[J]. 应用化学, 2021, 38(11): 1531-1540.
[7]	卫强, 彭喜悦. 碧桃花、叶、茎、果实挥发油成分及抗油脂氧化、抑菌作用[J]. 应用化学, 2016, 33(8): 945-950.
[8]	卫强, 刘洁. 大叶黄杨叶、茎、果挥发油成分及抗病毒作用[J]. 应用化学, 2016, 33(6): 719-726.
[9]	闫志慧, 姜珂, 陈立书, 朱仝飞, 陈竹, 杨永建, 王大成. 藏药柳茶叶乙醇水提取物中化学成分的鉴定[J]. 应用化学, 2014, 31(02): 237-241.
[10]	曾志, 谢润乾, 谭丽贤, 张涛. 川芎水蒸气蒸馏和超临界CO₂提取物化学成分的GC-MS分析鉴别[J]. 应用化学, 2011, 28(08): 956-962.
[11]	刘雄民, 李伟光, 李飘英, 周永红. 蒜头果挥发油提取及化学成分分析[J]. 应用化学, 2007, 24(8): 968-970.
[12]	肖瑜, 鲜启明, 伏彩中, 高士祥, 孙成. 环境修复植物黑藻的化学成分[J]. 应用化学, 2006, 23(9): 949-952.
[13]	蓝文健, 李厚金. 甜草Oldenlandia cantonensis How的化学成分[J]. 应用化学, 2006, 23(8): 871-874.
[14]	张广文, 马祥全, 曾陇梅, 苏镜娱a. 南海短足软珊瑚Cladiella sp.的化学成分[J]. 应用化学, 2003, 20(11): 1021-1024.
[15]	王明焱, 陆伟刚, 曾陇梅, 苏镜娱. 莳萝曲网海绵化学成分的研究[J]. 应用化学, 2002, 19(1): 1-3.