UPLC -Q Exactive Plus -MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选

张瀚水, 龚本义, 南敏伦, 赫玉芳, 赵昱玮, 吴丛梅, 殷玉和

应用化学 2023, 40 (11): 1587-1594. DOI:10.19894/j.issn.1000-0518.230147

摘要（189）

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采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定，并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C₁₈色谱柱（2.1 nm×30 nm， 3 μm），以0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）进行梯度洗脱，流速1.0 mL/min，进样量10 μL。质谱分析采用ESI离子源，在正离子模式下采集数据，利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析，共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3，3'，4'，7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选，发现芹菜素和3，3'，4'，7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶（XO）表现出较强的抑制活性，IC₅₀分别为18.11和34.59 μmol/L。

Sample	Inhibition ratio/%						IC₅₀/（μmol·L^-1）
Sample	50 μmol/L	100 μmol/L	200 μmol/L	400 μmol/L	800 μmol/L	1600 μmol/L	IC₅₀/（μmol·L^-1）
Acacetin	10.9	19.8	32.5	44.6	49.7	52.8	90.53
Puerarin	12.8	21.9	38.7	51.6	62.5	68.2	43.67
Apigenin	22.8	39.8	52.8	69.8	79.1	82.4	18.11
Phlorizin	6.9	13.5	29.5	53.2	68.2	70.1	45.05
Isorhamnetin	6.5	11.9	22.1	32.1	38.2	42.1	＞100
Fisetin	14.6	26.4	43.7	56.7	64.4	73.2	34.59
Allopurinol	16.5	27.6	41.5	55.8	70.7	78.9	32.38

现研究报道芹菜素、槲皮素等黄酮类化合物［17-18］对XO表现出较好的抑制活性，故初步分析已知的6种物质抑制XO活性水平，测定6种成分对XO的抑制率，实验结果表明，各抑制率随各样品浓度升高均有提升，其中异鼠李素和刺槐素具有较弱的抑制活性，异鼠李素IC ₅₀大于100，刺槐素IC ₅₀为90.53 μmol/L；芹菜素和3，3'，4'，7-四羟基黄酮则表现出较强的抑制活性，IC ₅₀分别为18.11、34.59 μmol/L，见表2。