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基于温敏性 NN-二甲基丙烯酰胺/ N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物的毛细管无胶电泳筛分介质
江凤浩, 洪瀚, 姜伯玮, 苏朝晖
应用化学    2023, 40 (9): 1312-1321.   DOI:10.19894/j.issn.1000-0518.230125
摘要   (219 HTML6 PDF (2905KB)(137)  

本文合成了NN-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物(P(DMA-co-NIPAM))和聚NN-二甲基丙烯酰胺(PDMA),并将二者共混制备毛细管无胶电泳筛分介质,旨在降低筛分介质粘度的同时增强其对DNA的分离性能。核磁共振氢谱(1H NMR)和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)证明了2种聚合物的成功合成。表征了P(DMA-co-NIPAM)/PDMA共混物溶液的流体力学直径(Dh)、低剪切粘度和吸光度,结果表明,P(DMA-co-NIPAM)聚合物具有温敏性,低临界溶解温度(LCST)为60~80 ℃。DNA筛分结果显示,PDMA中添加了10% P(DMA-co-NIPAM)的复合筛分介质性能最好,相比PDMA粘度降低19%以上,对大DNA片段的分辨率和理论塔板数均明显提高,分离时间缩短4%,显示了优良的分离性能。

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图1 P(DMA-co-NIPAM)随温度升高的转变过程示意图
正文中引用本图/表的段落
综合考虑高筛分性能、低粘度、可自涂覆、在紫外-可见光区域无明显吸收、与DNA/染料分子没有特异性结合等要求,将 NN-二甲基丙烯酰胺(DMAA)和 N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)共聚,得到P(DMA- co-NIPAM)无规共聚物,用于制备筛分介质。PDMA筛分性能优异且具有自涂覆性能,粘度比聚丙烯酰胺更低,NIPAM则是应用非常广泛的温敏性单体,通过控制单体比例共聚物的LCST可在32~72 ℃之间调节[14]。当温度升高直至大于聚合物的LCST时,P(DMA- co-NIPAM)在一定程度上发生皱缩,导致聚合物的“网孔”尺寸变小,如图1所示。
从核磁共振氢谱(辅助材料图S1A)清晰地看到DMAA聚合反应后代表单体的C C氢原子峰(6.62、6.06和5.71)消失,在2.30~2.73和1.16~1.77处出现了代表聚合物的经典包峰,且FT-IR光谱(辅助材料图S1B)中DMAA单体在1612 cm-1处的C C伸缩振动峰在反应产物中消失,证明PDMA聚合物的成功合成。GPC表征结果(辅助材料图S2)显示PDMA的数均相对分子质量( M n)为3.58×105,PDI=3.15。
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