液质联用技术分析西洋参花化学成分及H9c2心肌细胞损伤保护作用

doi:10.19894/j.issn.1000-0518.220131

摘要/Abstract

摘要：

高温高压转化前后西洋参花醇提液经正己烷、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分级萃取后共得10种不同极性组分，通过H9c2心肌细胞损伤模型筛选最佳活性组分，并对其进行抗氧化活性的测定以及化学组成分析，利用液质联用技术检测其处理前后的化学成分。结果表明，提取的10种活性组分中，高温高压转化后西洋参花乙酸乙酯萃取层（PEE）能够有效保护H9c2心肌细胞损伤，显著提高细胞存活率并降低细胞ROS水平，与高温高压转化处理前西洋参花乙酸乙酯层（OEE）相较，二者总体皂苷含量相近且均具有较强的抗氧化活性。通过液质分析，初步确定了PEE中所含高温高压转化裂解生成的Rk₁与Rg₅更具良好的心肌细胞损伤保护作用。

关键词: 西洋参花, 心肌保护, 非药用部位, 人参皂苷, 抗氧化, 液质联用

Abstract:

In this study， the American ginseng flower is pre-treated by high temperature and pressure and the ethanol extract of American ginseng flower is divided by n-hexane， chloroform， ethyl acetate and n-butanol consequently. A total of 10 different polar components are obtained. The best active fraction is screened by oxidative-induced H9c2 Cardromyocytes. The ability of free radical scavenging and chemical composition of the fractions are analyzed by LC-MS. The results show that the processed ethyl acetate extraction （PEE） of American ginseng flowers effectively protects oxidative-induced H9c2 Cardromyocytes， significantly improves cell viability and reduces cell ROS levels. Compared with the original ethyl acetate extraction （OEE）， the ginsenoside content of the two groups is similar and shows strong antioxidant capacity. Through LC-MS analysis， it is preliminarily determined that Rk₁ and Rg₅ generated by high temperature and pressure transformation in PEE. Therefore， processed American ginseng flower has better protective effect on oxidative-induced H9c2 Cardromyocytes than original.

Key words: American ginseng flower, Myocardial protection, Non-medicinal part, Ginsenosides, Antioxidation, LC-MS

中图分类号:

O629

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图/表 7

图 1 西洋参花不同极性组分改善H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤保护作用

Fig.1 Different polar components of American ginseng flower improve the protective effect in H2O2-induced H9c2 cellsNote： *P＜0.05， ** P＜0.01， ***P＜0.001

图 2 西洋参花不同极性组分降低H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤ROS水平作用

Fig.2 Different polar components of American ginseng flower lower the ROS level in H2O2-induced H9c2 cellsNote： *P＜0.05， **P＜0.01， ***P＜0.001

图 3 OEE & PEE组分对DPPH自由基清除能力的测定

Fig.3 Determination of DPPH free radical scavenging

图 4 OEE & PEE组分对·OH自由基清除能力的测定

Fig.4 Determination of ·OH free radical scavenging

表1 OEE与PEE化学组成测定

Table 1 Chemical compositions of OEE and PEE

Ingredient content	w（American ginseng flower）/%	w（Original ethyl acetate extracts）/%	w（Processed ethyl acetate extracts）/%
Moisture	9.37±0.03	—	—
Total ash	6.19±0.04	—	—
Total ginsenosides	—	43.26±0.21	43.57±0.29
Total protein	—	6.32±0.16	5.09±0.07
Total flavone	—	2.74±0.20	2.05±0.22

图 5 OEE & PEE负离子模式下总离子流图

Fig.5 Total ion chromatogram of OEE & PEE in negative scan mode of LC-MS

表2 负离子模式下LC-MS分析OEE & PEE成分分析

Table 2 Components analysis of OEE & PEE by LC-MS with negative scan mode

No.	t_R/min	Compound	Found mass	Theoretical mass	Mass error/ （×10^-6）	OEE/%	PEE/%
1	12.96	Rg₁	845.492 1	845.490 3	-1.8	0.31	0.17
2	13.44	Re	991.550 3	991.548 2	-2.1	0.74	0.47
3	14.54	p-F₁₁	799.480 5	799.484 4	-3.9	0.95	1.6
4	18.39	Unknown	843.476 1	—	—	0.22	0.57
5	18.81	Rf	845.491 8	845.490 4	-1.4	48.32	12.91
6	19.79	Unknown	843.476 8	—	—	0.23	0.82
7	21.07	20（S）-Rg₂	829.497 4	829.495 9	-1.5	14.9	8.18
8	21.59	20（R）-Rg₂	829.497 7	829.495 8	-1.9	0.18	1.94
9	37.88	Rk₁	811.486 3	811.485 1	-1.2	0.18	3.2
10	38.16	Unknown	843.475 9	—	—	0.02	0.88
11	38.94	Rg₅	811.486 5	811.485 1	-1.4	0.29	3.18

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