无花果叶中有效成分鉴别及含量测定

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赵默涵, 刘志强, 耿爱芳, 谢文兵. 无花果叶中有效成分鉴别及含量测定[J]. 应用化学, 35(11): 1391-1398
ZHAO Mohan, LIU Zhiqiang, GENG Aifang, et al. Identification and Content Determination of Active Constituents of Fig Leaves[J]. Chinese Journal of Applied Chemistry, 35(11): 1391-1398 复制到剪切板

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无花果叶中有效成分鉴别及含量测定

赵默涵^a,^b, 刘志强^b, 耿爱芳^a,^*, 谢文兵^b,^*

^a长春理工大学化学与环境工程学院长春 130022

^b中国科学院长春应用化学研究所,国家电化学和光谱研究分析中心长春 130022

通讯联系人:耿爱芳,副教授; Tel:0431-85583008; E-mail:gengaf687@Sina.com; 研究方向:无机纳米材料制备及应用;共同通讯联系人:谢文兵,高级工程师; Tel:0431-85262166; E-mail:xiewenbing@ciac.ac.cn; 研究方向:天然药物的色谱质谱分析

收稿日期:2018-02-26 修回日期:2018-04-19 接受日期:2018-06-05

基金:国家自然科学基金资助项目(81473537);

摘要

近年来,无花果叶片中所含成分分析主要集中在同类型物质或整类物质,而对多种类型单一有效物质的定性定量研究较少。本文采用溶剂浸提-超声波辅助法对无花果叶片中的有效成分进行了提取,利用气相色谱-质谱和超高效液相色谱-离子阱质谱对有效成分进行了鉴定。结果表明,无花果叶中主要成分为绿原酸、芦丁、补骨脂素和佛手苷内酯。采用单因素实验法,确定了4种成分的最佳提取工艺。利用高效液相色谱建立了绿原酸、芦丁、补骨脂素和佛手苷内酯的定量分析方法。绿原酸在1.84~9.2 μg范围内有良好的线性关系( R²=0.9991),回收率为95.2%;芦丁在3.4~17 μg范围内有良好的线性关系( R²=0.9981),回收率为96.8%;佛手内脂在4~20 μg范围内有良好的线性关系( R²=0.9998),回收率为89.5%;补骨脂素在4~20 μg范围内有良好的线性关系( R²=0.9963),回收率为87.1%。

关键词: 无花果叶; 绿原酸; 芦丁; 补骨脂素; 佛手苷内酯

中图分类号:O657 文献标志码:A 文章编号:1000-0518(2018)11-1391-08

Identification and Content Determination of Active Constituents of Fig Leaves

ZHAO Mohan^a, LIU Zhiqiang^b, GENG Aifang^a, XIE Wenbing^b

^aSchool of Chemical and Environmental Engineering,Changchun University of Science and Technology,Changchun 130022,China

^bNational Analytical Research Center of Electrochemistry and Spectroscopy,Changchun Institute of AppLied,Chemistry Chinese Academy of Sciences,Changchun 130022,China

Corresponding author:GENG Aifang, associate professor; Tel:0431-85583008; E-mail:gengaf687@Sina.com; Research interests:preparation and application of inorganic nanomaterials;Co-corresponding author:XIE Wenbing, senior engineer; Tel:0431-85262166; E-mail:xiewenbing@ciac.ac.cn; Research interests:chromatography-mass spectrometry analysis of natural drugs

Received:2018-02-26 Revised:2018-04-19 Accepted:2018-06-05

Fund:Supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81473537); }

Abstract

In recent years, studies on the extraction and analysis of the components contained in fig leaves have focused on the analysis of the same type or the whole group of single compounds, and there are few qualitative and quantitative studies on single effective substances in various types. In this study, solvent extraction-ultrasonic-assisted extraction was used to extract the active ingredients of fig leaves, and the active ingredients were identified by gas chromatography-mass spectrometry and ultrahigh performance liquid chromatography-ion trap-mass spectrometry. The results show that the main components of fig leaves are chlorogenic acid, rutin, psoralen and bergapten. The single factor experiments were used to determine the best extraction process for the four components. A quantitative method for the determination of chlorogenic acid, rutin, psoralen and bergapten was established by high performance liquid chromatography. The linear relationship is obtained for chlorogenic acid in the range of 1.84~9.2 μg( R²=0.9991) with recovery rate of 95.2%, rutin in the range of 1.84~9.2 μg( R²=0.9981) with a recovery rate of 96.8%, bergapten in the range of 4~20 μg( R²=0.9998) with a recovery rate of 89.5%, and psoralen in the range of 4~20 μg( R²=0.9963) with a recovery rate of 87.1%, respectively.

Keyword: fig leaves; chlorogenic acid; rutin; psoralen; bergapten

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无花果具有丰富的营养价值和药用价值,早在《本草纲目》中已有阐明:“味甘,平,无毒,治五痔、咽喉痛。”《本草汇言》中提及:“去湿热,解疮毒。”在传统医学治疗中,无花果的果实、叶片、枝干乃至全株均可入药,常被用来治疗痔疮^[1]、湿热腹泻^[2]等疾病。无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11]。大量研究表明,这些成分具有较好的抗氧化作用^[12]、抗炎作用^[13]、抗癌作用^[14]和抗菌作用^[15],对骨质疏松^[16]有较好的预防作用,同时还可以降低人体内的血糖含量^[17]等。近年来,对于无花果叶片所含成分提取分析的研究,主要关注同类型和单一化合物的提取及鉴定。 Takahashi等^[18]通过溶剂浸提法对无花果叶中的成分进行了提取及鉴定,发现其中含有绿原酸、咖啡酰苹果酸等多种具有抗氧化活性的物质。李军等^[19]通过加热回流法对无花果叶片中的补骨脂素和佛手苷内酯进行了提取,其含量分别是1.91和0.82 mg/g。张纵圆等^[20]采用溶液浸提法提取了无花果叶中的多酚,含量为5.162 g/L。刘毅等^[21]通过超声波辅助提取法得到无花果叶中的补骨脂素含量为353.2 μg/g。崔鹏等^[22]通过微波辅助提取法提取了无花果叶中的总黄酮,含量为20.56 mg/g。尼加提·沙吾提等^[23]利用超声波辅助提取法在无花果叶中提取芦丁及补骨脂素,提取率分别是0.492%、0.590%。 Wang等^[10]通过使用绿色溶剂-深度共晶溶剂(DES)法提取无花果叶中的佛手苷内酯,提取得率为2.475 mg/g。本文基于溶剂浸提-超声波辅助法对无花果叶片中的有效成分进行了提取,利用气相色谱-质谱(GC-MS)和超高效液相色谱-离子阱质谱(UPLC-IT-MS)鉴定了无花果叶提取物中主要成分为绿原酸、芦丁、补骨脂素及佛手苷内酯。利用高效液相色谱法(HPLC)建立了4种成分的定量分析方法。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

Ultimate 3000型高效液相色谱(HPLC,赛默飞世尔科技有限公司);Finnigan LXQ型超高效液相色谱-离子阱质谱联用仪(UPLC-IT-MS,赛默飞世尔科技有限公司);AgiLent 5975-6890N型气相色谱-质谱联用仪(GC-MS,美国AgiLent公司);KQ3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FW100型高速万能粉碎器(天津市泰斯特仪器有限公司);GL124-1SCN型电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);L2-4K型离心机(湖南可成仪器设备有限公司);PURELAB Classic型超纯水仪(英国ELga公司)。

甲醇(色谱纯,赛默飞世尔科技有限公司);乙醇,丙酮,冰乙酸均为分析纯试剂,购自天津市光复科技发展有限公司。选择新疆9~11月份的无花果叶为样品,取鲜无花果叶去尘后,放入烘箱中低温烘干,干燥后的叶片用高速万能粉碎机粉碎,过20 μm筛,取粉末备用。补骨脂素标准品,佛手苷内酯标准品,芦丁标准品,绿原酸标准品均购自于四川维克奇生物科技有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 提取方法

精密称取无花果叶粉1.0 g,按照料液比1∶10(g∶mL)的比例,加入80%的乙醇浸泡2 h后,冷水浴超声20 min,4000 r/min离心20 min,取上清液,即为无花果叶提取物。

1.2.2 气相色谱-质谱

GC条件 HP-5MS石英毛细柱,进样口温度250 ℃,载气为高纯He气(纯度≥99.999%),流速1 mL/min,进样量1 μL,采用10∶1分流进样方式。色谱柱温度:初始温度60 ℃,保持1 min,以10 ℃/min升至280 ℃,保持7 min,进样口温度:260 ℃。

MS条件电离方式:EI,电子能量70 eV,电子倍增器电压1200 V,质量扫描范围:20~550 amu,离子源温度230 ℃,四极杆温度150 ℃。

1.2.3 超高效液相色谱-离子阱质谱

UPLC条件色谱柱为Kromstar C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),梯度洗脱,流动相为甲醇:水(体积比):0 min(10∶90),5 min(10∶90),10 min(50∶50),60 min(100∶0),65 min(100∶0),70 min(10∶90)。流速为0.8 mL/min。

IT-MS条件 ESI源,源电压5k V,毛细管温度275 ℃,毛细管电压49 V,载气为高纯N₂气(纯度≥99.999%),进样量10 μL。

1.2.4 高效液相色谱

HPLC条件色谱柱为C18色谱柱(4.6 mm×500 mm,5 μm),检测波长为350 nm,梯度洗脱,流动相为甲醇:0.04%乙酸溶液(体积比):0 min(30∶70),15 min(30∶70),25 min(50∶50),35 min(85∶15),40 min(30∶70)。流速为1 mL/min。

2 结果与讨论

2.1 最佳提取工艺

采用单因素分析方法确定了无花果叶中有效成分的最佳提取工艺,结果见表1~表5。实验结果表明,无花果叶中成分的最佳提取工艺为:采用80%的乙醇作为浸提溶剂,料液比为1∶10(g∶mL),浸泡时间2 h,冷水浴超声20 min。

表1 不同提取方法中无花果叶有效成分的提取率 Table 1 Extraction rate of effective compositions of fig leaves in different extraction methods

由表1可以看出,采用索氏提取法和加热回流法提取时,由于提取温度过高,会导致绿原酸受热分解,致使绿原酸的提取率较低,而在冷水浴中超声,绿原酸不会受热分解,其它3种成分的提取率均高于索氏提取法和加热回流法。因此,最佳提取方法为超声波辅助浸提法。

表2 不同提取溶剂中无花果叶有效成分的提取率 Table 2 Extraction rate of effective compositions of fig leaves in different extraction solvents

由表2可以看出,采用控制变量法进行实验时,在其它条件相同的情况下,与甲醇和丙酮相比,选择乙醇为提取剂时,4种成分提取率均为最高,因此,乙醇为最佳提取剂。

表3 不同超声时间中无花果叶有效成分的提取率 Table 3 Extraction rate of effective compositions of fig leaves in different ultrasonic time

由表3可以看出,水浴超声时间对4种成分的提取率影响并不大,为了节约资源,节省时间,选择最佳超声时间为20 min。

表4 不同料液比中无花果叶有效成分的提取率 Table 4 Extraction rate of effective compositions of fig leaves in different solid-liquid ratios

由表4可以看出,当其它条件完全相同时,随着料液比浓度的增大,有效成分的提取率逐渐降低,料液比为1∶10(g∶mL)的情况下,4种成分的提取率相对较高,因此,最佳料液比为1∶10(g∶mL)。

表5 不同提取剂浓度中无花果叶有效成分的提取率 Table 5 Extraction rate of effective compositions of fig leaves in different solvent concentrations

分别设定浸提液乙醇水溶液浓度为10%~90%,考察乙醇浓度对提取率的影响,结果见表5。随乙醇浓度的增加,各有效成分的提取率均逐渐增大,当选择80%乙醇为提取剂时,4种成分的提取率均达到最大,且不随乙醇浓度的增加而增大,因此,最佳乙醇浓度为80%。

2.2 无花果叶中有效成分定性、定量分析

2.2.1 气相色谱-质谱

由于GC-MS具有稳定的电离能及标准数据库,因此,无需使用标准物质,可以直接确定无花果叶提取物中的成分。利用GC-MS鉴定了无花果叶提取物中含有补骨脂素和佛手柑内酯,如图1所示。由图1可知,在总离子流(TIC)色谱图中,保留时间为17.981 min的是补骨脂素,保留时间为20.166 min的是佛手苷内酯。该结果与张吟等^[24]通过GC-MS对无花果叶提取物的分析结果相一致。

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	图1 无花果提取物GC-MS分析Fig.1 Analysis of fig leaves extracts by GC-MS A.Total ion current map; B.Mass spectra for psoralen; C.Mass spectrum for bergapten

2.2.2 超高效液相色谱-离子阱质谱

利用UPLC-IT-MS鉴定了无花果叶提取物中含有绿原酸、芦丁和佛手柑内酯,如图2所示。由图2可以看出, m/z 609.4是芦丁失去1个H原子而产生的准分子离子峰, m/z 215.19是佛手苷内酯失去1个H原子而产生的准分子离子峰, m/z 353.25是绿原酸失去1个H原子而产生的准分子离子峰。

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	图2 无花果叶提取物UPLC-IT-MS分析Fig.2 Analysis of fig leaf extracts by UPLC-IT-MS A.Rutin; B.Bergapten; C.Chlorogenic acid

2.2.3 高效液相色谱

利用HPLC对4种成分进行分析,如图3所示。由图3可以看出,在相同的保留时间内,无花果叶提取物中的成分与绿原酸、芦丁、补骨脂素、佛手苷内酯标准品相一致,通过计算可以得知各成分的含量:绿原酸的含量为0.452 mg/g、芦丁的含量为3.92 mg/g、佛手内脂的含量为14.3 mg/g、补骨脂素的含量为7.48 mg/g。与已报道过的文献[10,19,21,23]相比较,本实验中补骨脂素及佛手苷内酯的提取率得到显著增加,同时,首次对无花果叶提取物中的绿原酸进行了定量分析。

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	图3 无花果叶提取物HPLC分析Fig.3 Analysis of fig leaf extracts by HPLC A.fig leaf extracts; B.our standard substances solution. a.Chlorogenic acid; b.Rutin; c.Psoralen; d.Bergapten

2.3 方法学考察

2.3.1 标准曲线

精密称取芦丁标准品、补骨脂素标准品、绿原酸标准品、佛手苷内酯标准品分别加乙醇制0.2 g/L的标准溶液。分别取4种标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mL,用色谱纯甲醇定容至10 mL,按照2.2节色谱条件进行测量,得到芦丁在3.4~17 μg范围内标准曲线为 Y=0.317 X-0.268( R²=0.9981),佛手苷内酯在4~20 μg范围内标准曲线为 Y=0.1851 X-0.059( R²=0.9998),补骨脂素在4~20 μg范围内标准曲线为 Y=0.3141 X-0.3113( R²=0.9963),绿原酸在1.84~9.2 μg范围内标准曲线 Y=0.3221 X-0.035( R²=0.9991),表明该实验中芦丁、补骨脂素、佛手苷内酯及绿原酸在一定范围内线性关系良好。

2.3.2 精密度实验

取2.3.1节中的标准溶液,按照同样的色谱条件,连续进样6次,分别测量芦丁、补骨脂素、佛手苷内酯和绿原酸的峰面积,根据下面的公式计算得知RSD分别为0.53%、0.37%、2.86%及1.31%,表明该实验精密度里良好。

RSD= $\frac{SD}{\bar{X}}$

式中,SD为标准偏差, $\bar{X}$ 为算数平均值。

2.3.3 重现性

分别取1 g粉碎后的无花果叶粉末6份,按照料液比为1∶10(g∶mL)的比例向其中加入80%乙醇溶液,浸泡2 h后,冷水浴超声20 min,取出后离心10 min,取上清液,利用高效液相色谱法测定各有效成分的峰面积。根据下面的公式计算得知,无花果叶提取物中含有绿原酸(0.041±0.009)%;补骨脂素(0.76±0.05)%;芦丁(0.47±0.08)%;佛手苷内酯(1.37±0.06)%,表明该方法重复性良好。

w/%= $\frac{A \times ρ_{0} \times V}{1000 \times A_{0} \times m}$ ×100%

式中, A为样品峰面积, A₀为对照品峰面积, ρ₀为对照品浓度(g/L), V为样品溶液体积(mL), m为样品质量(g)。

2.3.4 加标回收率

取提取后的样品溶液5份,分别向其中加入20、40、60、80和100 μL的2.3.1节中制备的混合标准溶液,用样品溶液定容至1 mL,利用高效液相色谱测其峰面积。加标回收率分别为:绿原酸95.2%(RSD=1.53%)、芦丁96.8%(RSD=0.87%)、补骨脂素87.1%(RSD=1.86%)、佛手苷内酯89.5%(RSD=2.32%),表明该方法回收良好。

3 结论

本文利用GC-MS、UPLC-IT-MS鉴定了无花果叶提取物中的4种主要成分:绿原酸、芦丁、补骨脂素及佛手苷内酯。结合已有报道,基于超声波辅助提取法结合乙醇浸提法,优化提取工艺,得到最佳提取方法,增加了绿原酸、芦丁、补骨脂素及佛手苷内酯的提取率。利用高效液相色谱建立了可同时测定4种成分的含量的分析方法。本研究为无花果叶中单一成分的提取分析研究提供了新的研究方法,并且对无花果叶片有效成分的深度开发起到重要的促进作用。

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2013

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WANG

Haiyan

, LIU

Bingbo

, GUO

Aixin

, et al. Clinical Observation of Fig Leaf Fumigation with Acupuncture in 45 Patients with Hemorrhoids[J]. Chinese J Basic Med Tradit Chinese Med, 2013, 19(10): 1181-1183(in Chinese).

王海燕, 刘炳波, 郭爱新, 等. 无花果叶熏洗联合针灸治疗痔疮45例临床观察[J]. 中国中医基础医学杂志, 2013, 19(10): 1181-1183.

摘　要：目的：观察无花果叶熏洗联舍针灸治疗痔疮的临床疗效。方法：将89例患者随机分成2 组，联合治疗组45例接受无花果叶熏洗结合针灸治疗，对照组44例单用无花果叶熏洗治疗，治疗2周后比较2组临床疗效。结果：治疗组总有效率 97．78％，对照组总有效率88．64％，2组差异有统计学意义，治疗组明显优于对照组（P〈0．05）。在临床症状改善方面，2组治疗后均有显著改善，但无花果叶熏洗联合针灸治疗组患者的改善程度优于对照组（P〈0．05）。结论：无花果叶熏洗联合针灸治疗痔疮有效率高，可有效改善肛门疼痛、瘙痒、脱出、便血等症状，临床疗效良好且经济安全。

... 在传统医学治疗中,无花果的果实、叶片、枝干乃至全株均可入药,常被用来治疗痔疮^[1]、湿热腹泻^[2]等疾病 ...

2013

0.0

... 在传统医学治疗中,无花果的果实、叶片、枝干乃至全株均可入药,常被用来治疗痔疮^[1]、湿热腹泻^[2]等疾病 ...

2015

0.0

HUANG

Dandan

. Extraction and Hypoglycemic Activity of Flavonoids in Ficus Carica Leaves[D]. Fujian: Fujian Medical University, 2015(in Chinese).

黄丹丹. 无花果叶总黄酮的提取及降血糖作用研究[D]. 福建: 福建医科大学, 2015.

目的：研究无花果叶总黄酮的提取工艺、主要成分测定；优化链脲佐菌素诱导的C57BL/6J糖尿病小鼠模型；比较四种不同品系无花果叶提取物的降糖作用，探讨不同剂量无花果叶提取物的降糖作用及其机制。　　方法：⑴采用乙醇浸提与超声波辅助相结合的方法提取无花果叶总黄酮，通过正交试验优选提取工艺；比较和确定含量测定的有效方法；采用气相色谱-质谱联用和超高效液相色谱法检测无花果叶提取物中的主要成分。⑵采用腹腔注射不同剂量STZ或联合4周高脂饮食，建立不同的C57BL/6J糖尿病小鼠模型，随访检测小鼠体重、饮水量、进食量及空腹血糖。⑶采用一次性腹腔注射STZ150 mg/kg制备C57BL/6J糖尿病小鼠模型，随机分组，灌胃不同品系的无花果叶提取物，检测小鼠空腹血糖、血清甘油三酯、胆固醇水平，观察胰腺及肾脏病理改变。⑷采用一次性腹腔注射STZ180 mg/kg制备C57BL/6J糖尿病小鼠模型，随机分组，分别给予二甲双胍、高、中、低剂量无花果叶提取物，阴性和阳性对照组给予等体积蒸馏水，随访6周，测定不同分组小鼠血糖、血脂、胰岛素、肝糖原及葡萄糖-6-磷酸酶和糖元磷酸化酶活性，观察胰腺病理改变。　　结果：①优选后乙醇浸提与超声波辅助相结合的无花果叶总黄酮的提取工艺：用5倍量石油醚超声振荡脱脂10 min，重复脱脂3次，浸泡乙醇浓度40％，超声功率400w，时间30 min，温度70℃，提取率均值为27.86%；Al(NO3)3-NaNO2-NaOH显色法是测定无花果叶总黄酮含量较合适的方法，提取物中总黄酮含量均值为9.47%。提取物的主要成分为芦丁、补骨脂素、佛手苷内酯。②STZ180 mg/kg单次给药建立的糖尿病小鼠模型较为长期、稳定。高脂饮食4周联合STZ150 mg/kg1次给药、高脂饮食4周联合STZ200 mg/kg均分2次给药得到的糖尿病小鼠模型较为长期和稳定。③四种品系无花果叶提取物干预组糖尿病小鼠的血糖均降低，丰产黄、紫果、日本紫果叶组甘油三酯水平降低。丰产黄、美利亚叶组糖尿病小鼠胰腺及肾脏病理改变均有一定程度改善。④无花果叶提取物各剂量组糖尿病小鼠的血糖显著降低，胆固醇无差异。高剂量组甘油三酯水平显著降低。各剂量组胰腺病理均有不同程度的改善，呈现一定的剂量依赖性。中、高剂量组肝糖元水平、葡萄糖-6-磷酸酶活性显著降低，而胰岛素水平无显著差异。　　结论：乙醇浸提加超声波辅助法是提取无花果叶总黄酮的有效方法。无花果叶提取物对 STZ诱导的糖尿病小鼠具有显著的降糖作用和一定的降血脂并改善胰腺病理损伤作用，其中丰产黄品系最优。葡萄糖-6-磷酸酶活性和肝糖元的水平调节可能是无花果叶提取物发挥降糖作用的机制。

... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2011

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ZHANG

Zejun

, SHA

Kun

. Study on Extraction of Total Flavonoids from Ficus carica Leaves by Ultrasound-assisted Method[J]. Food Res Dev, 2011, 6(32): 14-16(in Chinese).

张泽俊, 沙坤. 超声波辅助提取无花果叶中总黄酮工艺的研究[J]. 食品研究与开发, 2011, 6(32): 14-16.

通过单因素试验和正交试验确定超声波辅助法提取无花果叶中总黄酮的优化工艺.结果表明:提取时间和料液比对总黄酮提取率有显著影响(P≤0.05),最佳工艺条件为:乙醇浓度为40％、提取时间为9 min、料液比为1∶40(g/mL),在此条件下总黄酮的得率为3.249％.

... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2014

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WANG

Zhenbin

, LIU

Jiayou

, MA

Haile

, et al. Extraction Process Optimization and Ultrasonic Modification of Polysaccharide from Ficus carica L. [J]. Trans Chinese Soc Agric Eng, 2014, 30(10): 262-269(in Chinese).

王振斌, 刘加友, 马海乐. 无花果多糖提取工艺优化及其超声波改性[J]. 农业工程学报, 2014, 30(10): 262-269.

... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2011

0.0

ZHANG

Junyan

, PENG

Shanshan

, FANG

Yuan

, et al. Extraction by Ultrasonic Method and Determination of Polysaccharide from Lycium Barbarum Leaves and Ficus caria Leaves[J]. Food Ind, 2011, 32(12): 98-100 (in Chinese).

张俊艳, 彭珊珊, 方圆, 等. 枸杞叶、无花果叶多糖的超声波提取和测定[J]. 食品工业, 2011, 32(12): 98-100.

采用超声波辅助水提取法对枸杞叶、无花果叶多糖进行提取。通过正交试验,最终确定多糖提取的最佳工艺条件为:提取温度80℃、料液比1:50、提取时间50min。制得枸杞叶、无花果叶粗多糖的提取得率分别为15.30%、11.82%。并且采用苯酚-硫酸光度法对多糖进行测定枸杞叶多糖含量为10.23%,无花果叶多糖含量是8.53%。

... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2008

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... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2008

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... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2016

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Dilaram

Nijat

, Hajiakber

Aisa

. Determination of Three Coumarins in Ficus carica L. Latex by HPLC Methods[J]. J Xinjiang Med Univ, 2016, 1(1): 52-55(in Chinese).

迪丽阿热姆·尼加提, 阿吉艾克拜尔·艾萨. HPLC法测定阿图什无花果叶汁中3种香豆素的含量[J]. 新疆医科大学学报, 2016, 1(1): 52-55.

摘　要：目的高效液相色谱法（HPLC法）测定阿图什无花果叶汁中伞形花内酯、佛手柑内酯和补骨脂素3种香豆素的含量。方法色谱柱Sunfire C_（18）ODS（250 mm×4.6 mm,5μm）,流速1 mL、min,检测波长为220 nm,柱温30℃,流动相为乙腈-水,流动相配比为0~10 min,乙腈25%;10~12min,乙腈由25%梯度增至50%;12~20 min,乙腈50%;20~22 min,乙腈由50%梯度增至100%。结果伞形花内酯、佛手柑内酯和补骨脂素分别在0.001~0.019 mg、mL（R~2=0.999 9）、0.01~0.19 mg、mL（R~2=0.9997）和0.01~0.19 mg、mL（R~2=0.9999）范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为98.09%（RSD=0.85%）、102.07%（RSD=1.07%）和101.00%（RSD=0.71%）。阿图什无花果叶汁中伞形花内酯、佛手柑内酯和补骨脂素3种香豆素的含量分别为1.09、9.89、24.58 mg/g。结论HPLC法简便、准确、稳定,可用于测定无花果叶汁中伞形花内酯、佛手柑内酯和补骨脂素的含量。

... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2017

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... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

... Wang等^[10]通过使用绿色溶剂-深度共晶溶剂(DES)法提取无花果叶中的佛手苷内酯,提取得率为2 ...

2017

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... 无花果叶片中含有大量对人体有益的成分,如黄酮类化合物^[3,4]、多糖^[5,6]、多酚类化合物^[7,8]及香豆素类化合物^[9,10,11] ...

2016

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... 大量研究表明,这些成分具有较好的抗氧化作用^[12]、抗炎作用^[13]、抗癌作用^[14]和抗菌作用^[15],对骨质疏松^[16]有较好的预防作用,同时还可以降低人体内的血糖含量^[17]等 ...

2010

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2017

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2015

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ZHANG

Heliang

. Study on the Preparation of Fig Lesves' Extracts and Their Antibacterial Effect[D]. Shandong: Qilu University Technology, 2015(in Chinese).

张合亮. 无花果叶提取物的制备及其抑菌效果研究[D]. 山东: 齐鲁工业大学, 2015.

无花果叶中含有很多活性成分(补骨脂素、香柠檬内酯、黄酮、苯甲醛等),在抗癌、护肝、降血糖、抑菌等方面发挥着重要作用。补骨脂素属于呋喃香豆素,为无花果叶中重要活性成分之一,其良好的抑菌性能已经引起研究者的重视和认可。因此对无花果叶的活性成分及其性能进行研究,有利于实现资源利用的最大化,有利于更充分发挥无花果这一栽培植物的价值。本课题简要综述了当前无花果叶的研究概况,从提取方法、工艺优化、样品纯化、抑菌及水果保鲜等方面进行了研究,主要研究结果如下：(1)在提取方法选择上,通过对比乙醇回流提取、超声辅助提取、微波辅助提取三种方法相应的补骨脂素含量(7.110 mg-g-1、8.805 mg·g-1、8.450 mg·g-1)、得率(0.711%、0.881%、0.845%),最终确定超声辅助提取作为制备无花果叶提取物的实验方法。(2)补骨脂素提取物制备工艺优化研究中,固定超声波频率(40KHz)、目数(100目),通过单因素实验确定在超声提取时间35min、45min、55min,料液比1：5、1：8、1：11,乙醇浓度70%、80%、90%,溶剂初始温度40℃、50℃、60℃基础上进行四因素三水平的响应面优化实验。最终确定超声提取补骨脂素的最佳工艺条件为：超声频率40kHz,无花果叶粉过100目筛,超声提取时间55min,溶剂初始温度60℃,料液比1：11,乙醇浓度76.6%。在此条件下得到的补骨脂素得率理论最大值为1.234%。经3次实验验证,实测值1.182%,与理论值基本吻合。(3)在补骨脂素提取物纯化研究中,确定了D101型大孔吸附树脂最佳吸附时间、吸附容量及洗脱溶媒最佳用量,在此基础上样品回收率达81.86%,通过高效液相色谱分析,纯化后的补骨脂素样品纯度达到85.34%,已满足后期活性实验的要求。(4)通过对不同时期无花果叶(威海青皮品种)中补骨脂素含量比较,发现秋季(9-11月份)无花果叶中补骨脂素含量要高于夏季。如果以提取无花果叶中补骨脂素为目的,建议10月份左右为宜,此时补骨脂素含量最高。(5)在补骨脂素提取物抑菌效果研究中,通过测定补骨脂素提取物对金黄色葡萄球菌{StapHylococcus aureus,革兰氏阳性菌G+)、大肠杆菌(Escherichia coli,革兰氏阴性菌G。)、酿酒酵母{Saccharomyces cerevisiae)、黑曲霉{Aspergillus niger)的MIC值,考察浓度、时间等因素对菌株菌落总数的影响及抑菌圈实验,发现补骨脂素提取物具有较好的抑菌效果,尤其针对G+、G-菌和酵母菌。抑菌效果与其浓度和处理时间呈正相关。但是对于霉菌,抑菌效果不明显。(6)在水果保鲜应用实验中,以无花果和葡萄为目标对象,通过将补骨脂素提取物与壳聚糖复配,考察不同组分、浓度保鲜液对无花果和葡萄失重率、菌落总数、腐烂率、可滴定酸和维生素C含量的影响,结果表明无花果叶补骨脂素提取物与壳聚糖的复配抑菌效果良好,在一定程度上可以延长无花果、葡萄鲜果的保鲜期,其中以0.15%补骨脂素提取物和1.5%壳聚糖复配时保鲜效果最佳。

2015

0.0

Wenjing

, LUO

Demei

, et al. Effect of Ficus carica L Leaf on Osteoporosisof OPG Knockout Mice[J]. China J Tradit Chinese Med Pharm, 2015, 30(10): 3687-3690(in Chinese).

杜文静, 罗莉, 罗德梅, 等. 无花果叶提取物对OPG基因敲除小鼠的抗骨质疏松作用研究[J]. 中华中医药杂志, 2015, 30(10): 3687-3690.

2013

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Qiuxia

, ZHANG

Yin

, HUANG

Dandan

, et al. Effects of Ficus carica Leaves Extracts on Blood Glucose Level and Antioxidative Ability in Diabetic Rats[J]. J Fujian Med Univ, 2013, 47(3): 146-149(in Chinese).

许秋霞, 张吟, 黄丹丹, 等. 无花果叶提取物对糖尿病大鼠血糖及抗氧化能力的影响[J]. 福建医科大学学报, 2013, 47(03): 146-149.

摘　要：目的研究无花果叶提取物对2型糖尿病大鼠血糖及抗氧化能力的影响。方法采用饲喂高糖高脂饲料联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型。大鼠分为正常对照组、模型对照组、无花果叶提取物高剂量组（1000mg／kg）和低剂量组（500mg／kg），每天灌胃给药1次，连续给药4周。给药第2周检测空腹血糖；给药第4周检测空腹血糖及血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GsH—Px）活性和肝脏s0D活性、谷胱甘胱（GSH）含量。结果无花果叶提取物能降低糖尿病大鼠的空腹血糖，明显提高其血清s0D、GSH—PX和肝脏s0D、GsH。结论无花果叶提取物能降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖并提高其抗氧化能力，其降血糖机制可能与提高糖尿病大鼠的抗氧化能力有关。

2014

0.0

... Takahashi等^[18]通过溶剂浸提法对无花果叶中的成分进行了提取及鉴定,发现其中含有绿原酸、咖啡酰苹果酸等多种具有抗氧化活性的物质 ...

2009

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Jun

, SU

Fan

, CHEN

Jipin

, et al. Determination of Psoralen and Bergapten in Leaves of Ficua carica L. in Atushi by HPLC[J]. Chinese J Med Guide, 2009, 11(9): 1607-1609(in Chinese).

李军, 苏凡, 陈吉平, 等. HPLC法测定阿图什市无花果叶中补骨脂素及佛手苷内酯含量[J]. 中国医药导刊, 2009, 11(9): 1607-1609.

目的:建立无花果叶中补骨脂素和佛手柑内酯的含量测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法测定补骨脂素和佛手柑内酯的含量,色谱柱kromasil C18 ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(65:35),测定波长为222nm,流速1mL·min-1,进样量4μl.结果:补骨脂素与佛手柑内酯线性良好,回归方程分别为:补骨脂素y=52850644.3891 x+41975.0624,r=0.9991,线性范围:(0.01639～0.1639)μg;佛手柑内酯y=69589020.2703 x+31347.1000,r=0.9994,线性范围:(0.00296～0.0296)μg.平均回收率,补骨脂素为97.8%,RSD 1.25%;佛手柑内酯为95.7%,RSD 4.75%.结论:本法简便、准确、稳定,重复性好,可用于测定无花果叶中补骨脂素和佛手柑内酯的含量.

... 李军等^[19]通过加热回流法对无花果叶片中的补骨脂素和佛手苷内酯进行了提取,其含量分别是1 ...

2009

0.0

ZHANG

Zongyuan

, LI

Maohua

, ZHANG

Tao

. Spectrophotometric Determination of Tannin in Xinjiang Fig Leaves[J]. Chinese J Anal Lab, 2009, 5(28): 188-190(in Chinese).

张纵圆, 李茂华, 张涛. 分光光度法测定新疆无花果叶中的单宁[J]. 分析实验室, 2009, 5(28): 188-190.

建立了钨酸钠-磷钼酸显色分光光度法测定新疆无花果叶中单宁的测定方法.在弱碱性条件下,新疆无花果叶中单宁与钨酸钠-磷钼酸形成稳定的蓝色配合物,在755 nm处测定显色液的吸光度确定单宁的含量.以单宁酸为标样,单宁量在2.04～12.24 mg/mL范围内,服从比耳定律,回归方程Y=35.37815x+0.0069,相关系数R2=0.9993,方法的回收率为96.20%～104.2%,相对标准偏差(RSD)为2.945%.

... 张纵圆等^[20]采用溶液浸提法提取了无花果叶中的多酚,含量为5 ...

2012

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LIU

, CHEN

. Comparison of Psoralen Contents of Fig Leaves Before and After Processing[J]. Herald Med, 2012, 31(05): 660-662(in Chinese).

刘毅, 陈莉. 无花果叶炮制前后补骨脂素含量比较[J]. 医药导报, 2012, 31(5): 660-662.

目的研究无花果叶炮制后补骨脂素含量变化.方法以无花果叶中活性成分补骨脂素为指标,采用高效液相色谱法测定含量,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长:246 nm,柱温:25℃,室温:25℃,流动相:甲醇∶水(50∶50),流速∶1.0 mL·min-1.结果无花果叶补骨脂素含量为353.2μg·g-1,制无花果叶补骨脂素含量97.71μg·g-1.结论无花果叶生品中补骨脂素含量明显高于炮制品.

... 刘毅等^[21]通过超声波辅助提取法得到无花果叶中的补骨脂素含量为353 ...

2018

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CUI

Peng

, CHEN

Zhiran

, SHI

Leige

. Microwave Extraction and Free Redical Scavenging Activity of Total Flavonnids from Ficus carica L. Leaves[J]. Food Res Dev, 2018, 39(1): 41-45(in Chinese).

崔鹏, 陈志冉, 史雷革. 微波提取无花果叶中的总黄酮及其体外抗氧化活性研究[J]. 食品研究与开发, 2018, 39(1): 41-45.

摘　要：采用微波法提取无花果叶中的总黄酮, 考察乙醇体积分数、液料比、提取功率、提取时间对总黄酮提取率的影响, 并进行四因素四水平正交试验, 得到总黄酮的最佳提取工艺条件为：乙醇体积分数 90%, 液料比 55 颐 1（mL/g）,提取功率200W, 提取时间 3 min, 黄酮的含量为 20.56 mg/g; 该提取物对 DPPH自由基去除率达 66.67%, 羟基自由基去除率达30.49%, 证明其具有较好的体外抗氧化能力.

... 崔鹏等^[22]通过微波辅助提取法提取了无花果叶中的总黄酮,含量为20 ...

2012

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Nijat

SAWUT

, YU

Yang

, Suleyman

Halik

. RP-HPLC Determination of Rutin and Psoralen in Leaves of Ficua carica L[J]. Mod Chinese Med, 2012, 14(10): 16-19(in Chinese).

尼加提·沙吾提, 鱼洋, 苏来曼·哈力克. RP-HPLC同时测定维吾尔药材无花果叶中芦丁和补骨脂素含量[J]. 中国现代中药, 2012, 14(10): 16-19.

... 沙吾提等^[23]利用超声波辅助提取法在无花果叶中提取芦丁及补骨脂素,提取率分别是0 ...

2011

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ZHANG

Yin

, CHEN

Yinong

, XU

Qiuxia

, et al. Analysis of Ficua carica Leaves Extraction by GC-MS and UHPLC/DAD[J]. J Fujian Med Univ, 2011, 45(06): 423-426(in Chinese).

张吟, 陈一农, 许秋霞, 等. 气质联用色谱法和超高效液相色谱法检测无花果叶提取物的化学成分[J]. 福建医科大学学报, 2011, 45(6): 423-426.

摘　要：目的检测无花果叶提取物的化学成分。方法采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）检测无花果叶提取物中的挥发性成分,采用超高效液相色谱法（UHPLC）检测无花果叶提取物中的芦丁。结果 GC-MS分离出16个成分,鉴定出13个成分,其中9个为新发现的成分。UHPLC鉴定出芦丁,并进行了含量测定。结论无花果叶提取物的主要成分为芦丁、补骨脂素、佛手苷内酯。

... 该结果与张吟等^[24]通过GC-MS对无花果叶提取物的分析结果相一致 ...